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豬血管生成素2(ANG-2)酶聯(lián)免疫分析試劑盒說明書

簡要描述:

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更新時間:2024-08-29;廠商性質(zhì):經(jīng)銷商;覽量:1970

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產(chǎn)品名稱:豬血管生成素2(ANG-2)酶聯(lián)免疫分析試劑盒說明書
英文名稱:Pig angiopoietin 2 (ANG-2) ELISA Kit
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T(兩種規(guī)格)
檢測方法:酶免法/酶聯(lián)免疫法(ELISA)
保存條件:2-8
產(chǎn)品性狀:液體盒裝
產(chǎn)品價格:含稅含運費,我們?nèi)烫峁?/span>ELISA實驗技術(shù)指導(dǎo)和ELISA試劑盒免費代測。
豬血管生成素2(ANG-2)酶聯(lián)免疫分析試劑盒說明書技術(shù)交流:

雙抗體夾心法(檢測未知抗原)

間接法(檢測未知抗體)

1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml,4 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37 孵育1小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37 孵育0.51小時,洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37 1030分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6
、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。

1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1-10ug/ml, 每孔加0.1ml4過夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,37孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
3
、加酶標抗體:于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.05ml,37孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37 1030分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6
、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。

豬血管生成素2(ANG-2)酶聯(lián)免疫分析試劑盒說明書操作步驟:
1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設(shè)標準品孔10孔,在*、第二孔中分別加標準品100μl,然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37溫育30分鐘。
4. 配液:將3048T20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水3048T20倍)倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。 6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3
8. 洗滌:操作同5
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37避光顯色15分鐘.
10.
終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
3,3,5,5-四甲基聯(lián)本胺(TMB)3,3,5,5-tetrametxylbenzidine (TMB)BR1g

CA1401-100gβ-丙安酸107-95-9100g0

ER0722Bcl I5000 units

植物RNA提取試劑盒(溶液法)24ml

吲哚-3-丁酸1g
間甲酚紫M-cresol purpleInd10g

SB1000藍蓋試劑瓶98

17-0050-01-25gSephadeex G-75 葡聚糖凝膠G-75--25g

balt (II) chloride, hexahydrate25g

wo7ium phosphate dibasic500g
[Tyr0]-Neurokinin A  Tyr-His-Lys-Thr-Asp-Ser-Phe-Val-Gly-Leu-Met-NH2

[Tyr0]-Neurokinin B  Tyr-Asp-Met-His-Asp-Phe-Phe-Val-Gly-Leu-Met-NH2

[Tyr0]-Prepro-Atrial Natriuretic Factor (104-123) (human)  Tyr-Ser-Ser-Asp-Arg-Ser-Ala-Leu-Leu-Lys-Ser-Lys-Leu-Arg-Al
RPE Others Mouse 小鼠 RPE / RPE2-1 人細胞裂解液 (陽性對照)

人表皮角質(zhì)細胞cDNAHEK cDNA

人脂肪細胞*培養(yǎng)基 100mL

ZA1細胞,轉(zhuǎn)S9基因倉鼠卵巢細胞 PC-12未分化(大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤) 中國倉鼠肺細胞;R 1610 [R1610]

EFNA2 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A2 / EFNA2 蛋白

AM(人腺樣囊性癌細胞(高轉(zhuǎn)移)) 5×106cells/瓶×2 綠色熒光蛋白標記小鼠前胃癌細胞;MFC-GFP
HFL1(人肺成纖維細胞) 5×106cells/瓶×2

小香豬皮膚細胞;SSC-S2

IGSF8 Others Human PGRL / IGSF8 人細胞裂解液 (陽性對照)

LS174T細胞,人結(jié)直腸腺癌細胞 人眼脈絡(luò)黑色素瘤細胞,MuM-2C細胞 人胰腺腺泡上皮癌;HPAC

人肺成纖維細胞RNAHPF miRNA5 μg

TNFRSF9 Others Human 4-1BB / CD137 / TNFRSF9 人細胞裂解液 (陽性對照)
豬血管生成素2(ANG-2)酶聯(lián)免疫分析試劑盒說明書人表皮角質(zhì)細胞cDNAHEK cDNA

RPE Others Mouse 小鼠 RPE / RPE2-1 人細胞裂解液 (陽性對照)

人脂肪細胞*培養(yǎng)基 100mL

ZA1細胞,轉(zhuǎn)S9基因倉鼠卵巢細胞 PC-12未分化(大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤) 中國倉鼠肺細胞;R 1610 [R1610]

EFNA2 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A2 / EFNA2 蛋白

AM(人腺樣囊性癌細胞(高轉(zhuǎn)移)) 5×106cells/瓶×2 綠色熒光蛋白標記小鼠前胃癌細胞;MFC-GFP

溫馨提示:使用前,請*閱讀說明書。本酶聯(lián)免疫試劑盒是基于經(jīng)典酶聯(lián)夾心技術(shù)原理,只能用于研究用途,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。

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